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操作人酯酶D(EsD)試劑盒時應該注意的幾個要點

更新時間:2025-11-13      瀏覽次數:14
  人酯酶D(EsD)試劑盒是一種基于酶聯免疫吸附試驗(ELISA)技術的檢測工具,廣泛應用于科研和臨床領域中。
 
  1.雙抗體夾心法:采用雙抗體夾心法進行測定。預先用純化的人酯酶D抗體包被微孔板,形成固相抗體層。當加入待測樣本后,樣本中的酯酶D會與固相上的抗體特異性結合。隨后加入HRP標記的檢測抗體,進一步與已結合的抗原形成“抗體-抗原-酶標抗體”復合物;
 
  2.洗滌步驟:通過多步洗滌去除未結合的成分,減少背景干擾;
 
  3.顯色反應:加入底物TMB后,在HRP酶的催化作用下轉化為藍色產物,再經酸性環境作用變為黃色。顏色的深淺與樣品中EsD濃度呈正相關,可通過分光光度計定量分析。
人酯酶D(EsD)試劑盒
 
  人酯酶D(EsD)試劑盒的使用注意事項:
 
  1.安全性操作
 
  -避免接觸有害試劑:終止液和底物A/B具有潛在危險性,若不慎接觸皮膚或眼睛,應立即用水沖洗;禁止用嘴吸取任何試劑,實驗過程中勿飲食、吸煙或化妝。
 
  -個人防護裝備:建議佩戴手套、護目鏡和實驗室外套,防止生物污染。
 
  2.樣本與試劑管理
 
  -禁用含NaN的樣品:疊氮鈉會抑制HRP活性,影響顯色反應,此類樣本不得用于檢測;
 
  -溶血標本慎用:溶血可能導致假陽性結果,需提前評估樣本質量;
 
  -保存條件合規性:試劑盒應冷藏保存(2-8℃),并在有效期內使用;已開啟的試劑需及時密封并盡快用完。
 
  3.實驗優化細節
 
  -準確計時控溫:溫育步驟的時間和溫度必須嚴格遵守說明書要求,以保證抗原抗體充分結合;
 
  -避免交叉污染:移液器、槍頭等工具專用化,防止不同樣本間的交叉污染;
 
  -預實驗驗證:初次使用時可通過預實驗確認最佳取樣量及稀釋比例,尤其針對高濃度樣本。
 
  4.應用限制說明
 
  -科研用途限定:該試劑盒僅適用于科學研究,不可用于臨床診斷;
 
  -種屬特異性匹配:雖然部分產品標注多物種適用(如人、鼠等),但需確保檢測目標與試劑盒設計一致,避免跨物種交叉反應導致的誤差。
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